Hvala, ker ste obiskali Nature.com.Različica brskalnika, ki jo uporabljate, ima omejeno podporo za CSS.Za najboljšo izkušnjo priporočamo, da uporabite posodobljen brskalnik (ali onemogočite način združljivosti v Internet Explorerju).Medtem bomo za zagotovitev stalne podpore spletno mesto upodobili brez slogov in JavaScripta.
Za posttravmatsko stresno motnjo (PTSM) je značilna oslabljena sposobnost nevtraliziranja odzivov strahu na znake, povezane s travmo.Študije na ljudeh in živalih kažejo na razlike v vključenosti določenih področij čelnega korteksa kot ključnih mediatorjev, ki določajo uspešnost zatiranja strahu, vendar medsebojno delovanje nevronskih vezij, ki določajo različno vključenost teh področij, ni jasno.Da bi bolje razumeli, kako se individualne razlike v spominu na izumrtje odražajo v razlikah v aktivnosti nevronskega vezja, smo označili projekcije podganje sublimbične skorje (IL) z retrogradnimi sledilci in primerjali nevronske projekcije znotraj in zunaj projekcijskih nevronov IL.Te podatke smo analizirali in jih združili glede na stopnjo ohranjenosti bledečega spomina pri podganah.Ugotovili smo, da so v celicah, ki projicirajo IL, nevroni v posteriornem paratalamusu pokazali povečano aktivnost pri podganah, ki so pokazale dober spomin na izumrtje.Poleg celic, ki projicirajo IL, so opazili povečano aktivnost Fos v izbranih območjih podganjega klaustruma in ventralnega hipokampusa z dobro ločljivostjo.Naši rezultati kažejo, da so razlike v spominu na izumrtje povezane s posebnimi vzorci nevronske aktivnosti znotraj in zunaj projekcij IL.
Kondicioniranje strahu se pojavi, ko je nevtralni dražljaj povezan z averzivnim brezpogojnim dražljajem (UCS), tako da prvotno nevtralni dražljaj, zdaj pogojni dražljaj (CS), izzove pogojni odziv strahu (CR) v odsotnosti UCS.Preobrat pogojnega strahu je povzročilo zmanjšanje CR na CS zaradi ponavljajoče se predstavitve CS v odsotnosti UCS1.Prejšnje raziskave so pokazale, da je posttravmatska stresna motnja (PTSD) povezana z nezmožnostjo zapomniti izumrtje pogojnih odzivov strahu2.Temelj kognitivno-vedenjske terapije za zdravljenje posttravmatske stresne motnje je terapija izpostavljenosti, ki temelji na izumrtju naučenih odzivov na strah3,4.Zato lahko študije individualnih razlik v strahu pred izumrtjem glodalcev in osnovnih nevronskih mehanizmov pomagajo razjasniti razlike v človeških odzivih na travmo in zdravljenje posttravmatske stresne motnje.Kljub napredku pri prepoznavanju nevronskih mehanizmov, ki ločujejo uspešne spomine na izumrtje od neuspešnih, je treba še veliko odkriti.
Modeli glodalcev so uporabni pri tem delu, ker obstajajo velike individualne razlike v spominu na izumrtje glodalcev 7,8,9,10.Prejšnje delo, ki je preučevalo nevronske mehanizme izumrtja strahu na populacijski ravni, je pokazalo, da je za priklic izumrtja potrebna aktivacija infralibične skorje (IL) (ref. 11, 12, 13, vendar glej 14), nekatere študije pa so odkrile zmanjšanje dejavnost glodalcev v IL, ki kažejo slab spomin na izumrtje v primerjavi z glodalci, ki se jih zelo bojijo.Vendar pa mehanizmi, s katerimi so IL različno vključeni v olajšanje odprave strahu pri glodavcih v primerjavi s tistimi, ki kažejo šibkejše izumrtje, niso jasni.
Ena od možnosti je, da so razlike v spominu na izumrtje strahu med posamezniki posledica diferencialne aktivacije specifičnih aferentnih IL.Anatomske študije18 so pokazale, da različna kortikalna in subkortikalna področja možganov pošiljajo goste projekcije v IL, ta pa pošilja eferentne projekcije v številna področja možganov.Študije na populacijski ravni so pokazale, da so projekcije IL na amigdalo pomembne za pridobivanje izumrtja strahu 20, 21, 22 in vnos IL iz bazolateralne amigdale (BLA) je prav tako povezan z učenjem izumrtja.Manj je raziskav o vpletenosti vezij, osredotočenih na IL, pri odpoklicu izumrtja, čeprav nedavno delo kaže, da sta tako ventralni kot dorzalni hipokampus vključena v napovedovanje IL.Eferentne projekcije IL na rekombinantno jedro talamusa očitno prav tako sodelujejo pri spominu na izumrtje strahu.
Te prejšnje študije začenjajo slikati interakcijo nevronskih vezij, ki sodelujejo pri priklicu izumrtja, vendar je zelo malo podatkov o tem, ali aktivnost v nevronskih vezjih, osredotočenih na IL, vpliva na individualne razlike pri priklicu izumrtja.Tukaj smo skušali ugotoviti, ali so razlike v spominu na izumrtje strahu med posamezniki povezane s spremembami v aktivaciji vnosa IL v določenih možganskih regijah.Zlasti smo ocenili aktivacijo aferentnih celic IL v paraventrikularnem jedru talamusa (PVT), ključnici (CLA), BLA in ventralnem hipokampusu (vHPC).Te možganske regije so bile izbrane zato, ker pošiljajo goste projekcije v IL in ker obstaja razlog za sum, da so morda vpletene v izražanje izumrtja strahu 18 .Na primer, nedavna študija je pokazala, da je PVT, regija, za katero je znano, da sodeluje pri pridobivanju in razmnoževanju strahu, potrebna za reprodukcijo izumrtja.Poleg tega so prejšnje študije pokazale povečano aktivnost bazalne amigdale in vHPC pri podganah, ki izražajo spomin na izumrtje.Končno je analiza klavstruma bolj raziskovalna, saj nobeno prejšnje delo ni ocenilo njegove vloge pri izumrtju.Vendar pa nedavno delo kaže, da igra vlogo pri kontekstualnem pogojevanju strahu29.
Retrogradne sledilnike, konjugirane z virusnim GFP, smo vbrizgali v IL podgan pred vedenjskim testiranjem, aktivnost Fos v aferentih IL pa smo izmerili med ponovitvijo izumrtja, priklicem strahu in pri podganah, ki niso bile podvržene vedenjskemu testiranju.Naši rezultati kažejo, da projekcije iz posteriornega paraventrikularnega talamusa v IL kažejo povečano aktivnost pri podganah, ki se uspešno spomnijo izumrtja.Poleg napovedi IL se je pri podganah, ki so dobro nazadovale, povečala živčna aktivnost na določenih področjih ključnice in ventralnega hipokampusa.Naši rezultati kažejo, da so vzorci intrinzične in ekstrinzične nevronske aktivnosti, projicirane na IL, povezani z individualnimi razlikami v spominu na izumrtje strahu.
Štiriinpetdeset odraslih samcev podgan Sprague-Dawley (300-325 g ob prihodu), pridobljenih iz Charles River Laboratories (Raleigh, NC), so uporabili kot subjekte.Podgane so bile nameščene v parih, s prostim dostopom do hrane in vode, v 12-urnem ciklu svetloba/tema (luči se prižgejo ob 7. uri zjutraj).Za te poskuse sta bili uporabljeni dve skupini podgan (n = 28 in n = 26).Po izključitvi smrti, kirurške napake, pomanjkanja izražanja GFP na ciljnem mestu, slabe kakovosti tkiva in vedenjskih težav (pojasnjenih v Metodah) je skupina za odpoklic izumrtja vključevala 21 podgan, skupina za odpoklic strahu pa je vključevala 7 podgan, hišne kletke.skupino je sestavljalo 7 podgan (35 podgan je bilo vključenih v končno analizo).Vse postopke je odobril institucionalni odbor za oskrbo in uporabo živali Univerze Stony Brook in so bili v skladu s smernicami ARRIVE (https://arriveguidelines.org) in smernicami NIH za oskrbo in uporabo laboratorijskih živali.
Podgane so bile zdravljene dva dni pred operacijo.Podgane smo anestezirali s ketaminom (87 mg/kg) in ksilazinom (10 mg/kg), jih dali v stereotaksični aparat (Stoelting, Woodale, IL) in prejeli enostranske injekcije AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) v IL.(uravnotežite levo in desno injekcijo).Za injiciranje je bila na mesto spuščena kanila velikosti 22 (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Vstavite 28G notranjo kanilo (povezano z infuzijsko črpalko prek cevi PE 20) v vodilno kanilo za dovajanje 0,6 µl virusa s hitrostjo 0,15 µl na minuto in pustite na mestu 5 minut, potem ko je infuzija nedotaknjena..Po šivanju so podgane injicirali meloksikam (1 mg/kg) in takoj, ko so se lahko premaknile, so jih vrnili v kletke.Podgane so bile v kletkah približno 7 tednov, da so omogočili okrevanje virusa in retrogradni transport.Tri podgane so poginile pod anestezijo, zaradi česar je 51 podgan (94 %) uspešno okrevalo po operaciji.
Vsi postopki so bili izvedeni v 32 cm × 25 cm × 21 cm komorah za kondicioniranje (Clever Systems Inc., Reston, VA), nameščenih v 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm zvočno absorbirajočih izolacijskih škatlah (Clever Sys. . Inc.).).Med sejami učenja izumrtja in priklica izumrtja je bil kontekst spremenjen, da se razlikuje od prvotnega pogojnega konteksta.Pogoj A (ustvarjanje strahu) je vključeval 28-voltne žarnice z žarilno nitko, gospodinjske žarnice (Chicago Micro Lighting, Združeno kraljestvo), medtem ko je pogoj B (usposabljanje za izumrtje, test priklica izumrtja in test priklica strahu) vključeval infrardeče LED sijalke (Univivi IR Illuminator, Shenzhen). ., Kitajska;U48R).Poleg tega ima Context A antivibracijska letvena tla s stenami iz nerjavečega jekla in pleksi stekla, Context B vsebuje pobarvane kovinske vložke na tleh in stenah.Oblika Context B je bila prav tako spremenjena z namestitvijo 33,5 cm x 21,3 cm ukrivljenega kovinskega vložka v standardno klimatsko komoro.Poleg tega so bile v kontekstu A komore obrisane s 5% ocetno kislino, medtem ko so bile v kontekstu B komore obrisane s 5% amonijevim hidroksidom.Končno, v kontekstu B, so podgane pripeljali v preskusno sobo v vedrih, namesto da bi jih valjali v kletkah na vozičkih.Vedenjske seje so bile posnete z zgornjo kamero, video signal iz vsake kamere pa je bil doveden v programsko opremo (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA), ki je ocenila vedenje bledenja na podlagi sprememb slikovnih pik.Parametri so bili izbrani tako, da se obnašanje bledenja, ki ga oceni računalnik, zelo ujema z obnašanjem usposobljenih opazovalcev, ocenjenim ročno.Vrednost, ki označuje odstotek časa zamrznitve, zbranega v 30-sekundnem intervalu.
Vsi vedenjski programi se izvajajo med svetlim delom cikla svetlo/tema.Podgane so bile zdravljene 5 dni pred začetkom vedenjskih postopkov in prepeljane v vedenjsko sobo za zadnje tri dni zdravljenja.Prvi dan vedenjskega testiranja je bila skupina podgan, ki so se spomnile izumrtja, postavljena v pogojni refleks s strahom, nato postavljena v kontekst A, 6 minut nestimuliranega obdobja aklimatizacije in nato obe kombinaciji 4 kHz, 76 dB, 30 s .ton in splošna prekinitev, 1,0 mA, udarec 1 s (2 min ITI).Za vse vedenjske treninge so podgane vrnili v kletke 2 minuti po zadnji predstavitvi dražljaja.Naslednji dan so podgane iz skupine za izumrtje in odpoklic postavili v kontekstno sobo B in izvedle 20 zvočnih predstavitev (2 min ITI) kot trening izumrtja po 6-minutnem obdobju privajanja.Naslednji dan so bile podgane v skupini za izumrtje reprodukcije izpostavljene 4 tonom v kontekstu B po 6-minutnem obdobju aklimatizacije kot test izumiranja.Podgane v skupini s spominom na izumrtje so bile perfundirane 60 minut po vedenjski seji.Skupina kontrolnih podgan, ki so vzbujale spomine na strah, je bila podvržena istemu postopku prvi dan odziva, pogojenega s strahom, v kontekstu A. Oseminštirideset ur pozneje so bile podgane postavljene v kontekstno sobo B in izpostavljene 4 zvočnim predstavitvam (2- minuta ITI) kot preizkus priklica.strah po 6-minutnem obdobju aklimatizacije.Podgane so bile perfundirane 60 minut po vedenjski seji.Skupina domačih kontrolnih podgan je ves čas poskusa ostala v svojih domačih kletkah in so bile perfundirane na isti dan kot poskusne podgane.Vsaka od dveh skupin podgan je bila razdeljena na dve seriji, število živali v vsaki skupini pa je bilo uravnoteženo med serijami.Ena podgana v skupini s spomini na strah je bila izključena iz analize, ker ni kazala znakov kondicioniranja strahu (zmrzovanje manj kot 15 % časa med testom spominov na strah).Glej sliko 2A za diagram vedenjske časovnice.
Podgane so bile predozirane z raztopino Fatal Plus (100 mg/kg), nato perfundirane z ledeno mrzlim 10 % PBS, čemur je sledil 10 % puferski formalin.Možgane smo odstranili in shranili v 30% raztopini saharoze v formalinu pri 4 °C približno 1 teden.Nato so bili možgani zamrznjeni in razrezani v 40 µm debel kriostat.Sekcije so bile zaporedno shranjene v 10% PBS pri 4 °C.Nato smo izvedli imunofluorescenco na prosto lebdečih odsekih, ki vsebujejo možgansko regijo, ki nas zanima.Odseke smo sprali 3-krat v 10% PBS po 5 minut.Odseke smo nato inkubirali v 5 % blokirni raztopini normalnega kozjega seruma 2 uri pri sobni temperaturi in nato še trikrat sprali po 5 minut v 10 % PBS.Sekcije smo nato čez noč inkubirali pri 4 °C v primarnih protitelesih (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA), razredčenih v 1 % BSA v 10 % PBS.Naslednji dan smo odseke 30 minut izpirali v 10 % PBS pri 4 °C, nato 3-krat po 5 minut v 10 % PBS in inkubirali s sekundarnim protitelesom (Alexa Fluor 594 kozji anti-zajec, rdeči konjugat, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) pri sobni temperaturi 2 uri.Po 3 dodatnih izpiranjih v 10% PBS za 5 minut so bili odseki postavljeni na stekelca in zapečateni s Fluoromount-G (Invitrogen).Oglejte si reprezentativne slike imunskega barvanja na sliki 3G.
Fluorescentni mikroskop, ki uporablja digitalni fotoaparat Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) in svetlobni mehanizem (Lumencor, Beaverton, OR), povezan z mikroskopom Zeiss, je bil uporabljen za pridobivanje slik iz vsake regije možganov, ki nas zanima, vključno z odseki, ki vsebujejo IL brez imunofluorescence.izvede za potrditev pravilne namestitve mesta injiciranja.Slike, uporabljene za štetje celic, so bile pridobljene pri 20-kratni povečavi.Za vsak del tkiva posnemite eno sliko s filtrom, ki omogoča vizualizacijo GFP, in eno sliko s filtrom, ki omogoča vizualizacijo rdečega konjugata Alexa Fluor v sekundarnem protitelesu, za sliko pa je bila uporabljena programska oprema za slikanje (Infinity Analyze, različica 3). prekrivanje.Zajemite vse slike vseh področij možganov z enakim časom osvetlitve in nastavitvami ojačitve.Šest podgan je bilo izključenih iz analize, ker je do glavnega prenosa virusa prišlo zunaj IL (88-odstotna stopnja zadetkov).Še osem podgan je bilo izključenih, ker kljub temu, da je virus napadel IL, niso pokazale zadostne ekspresije GFP v vseh ciljnih regijah možganov, ki jih zanimajo.Poleg tega je bila ena podgana izključena zaradi slabe kakovosti tkiva.
Prilagodite svetlost in kontrast, da zmanjšate hrup v ozadju na sliki J (NIH) z enakim postopkom za vsako sliko.Štetje celic za skupne retrogradno označene celice, skupne celice, označene s Fos, in skupne dvojno označene celice je izvedel ročno eksperimentator, ki ni identificiral živali, z uporabo vtičnika za citometer Image J.Število celic je bilo normalizirano na celice/mm2.Za analizo izražanja Fos v celicah, ki projicirajo IL, je bilo število dvojno označenih celic normalizirano na skupno število retrogradno označenih celic.Za analizo mBLA, mvHPC in pvHPC je bilo število celic iz več 20x slik sešteto in normalizirano na celice/mm2.Za analizo preostalih predelov možganov je bila analizirana 20-kratna slika ali del 20-kratne slike in normalizirana na celice/mm2.Analiza vHPC je vključevala regije CA1, CA2 in subdominantne regije vHPC.Slika 1 prikazuje možganske regije, analizirane s slikami, ki označujejo anteriorno-posteriorno mejo ravnine.
Okrajšave in lokacija zanimivih regij možganov.Razlaga okrajšav in lokacij možganskih regij, navedenih v rokopisu.Zemljevid možganov v javni lasti, vzet iz Swanson (2004) Zemljevid možganov: Struktura podganjih možganov, 3. izdaja, licencirana pod mednarodno licenco Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), ki je na voljo za prenos na https://larrywswanson.com.
Odstotek časa zamrznitve je povprečen za 30-sekundno obdobje predvajanja tona, brez vmesnih intervalov.Stopnje priklica izumrtja so bile izračunane tako, da se odstotek časa zbledenja med priklicem izumrtja izrazi kot odstotek bledenja med prvimi 4 poskusi usposabljanja za izumiranje (zbledenje med štirimi toni priklica izumrtja/zbledenje med prvimi štirimi toni usposabljanja za izumiranje*100).Nizki rezultati kažejo na dober spomin na bledenje, visoki rezultati pa na slab spomin na bledenje.Podgane so bile razvrščene glede na oceno priklica izumrtja, pri čemer so bile podgane v zgornji tretjini ocene priklica izumrtja razvrščene kot "slabe podgane pri izumrtju", podgane v zadnjih dveh tretjinah ocene priklica izumrtja pa so bile razvrščene kot "dobre".Podgane, ki bledijo spominu.
Neparametrični testi se uporabljajo, ker podatki pogosto kršijo predpostavke o normalni porazdelitvi in/ali homogenosti varianc.Spearmanova korelacija ranga je bila uporabljena za ugotavljanje, ali obstaja pomembna povezava med rezultati izumrtja in markerji Fos ter dvojnimi markerji v zanimivih možganskih regijah pri vseh podganah, ki so bile podvržene testu izumrtja.Mann-Whitneyjev U-test je bil uporabljen za ugotavljanje, ali obstaja razlika med dvema neodvisnima skupinama.Kruskal-Wallisov test se uporablja za ugotavljanje, ali se 2 ali več skupin med seboj razlikujeta, Dunnov večkratni primerjalni test pa se uporablja, kadar je Kruskal-Wallisova statistika pomembna.Zbledenje med učenjem izumrtja je bilo ocenjeno z analizo variance ponovljenih meritev s skupino kot medpredmetnim dejavnikom in testom kot znotrajpredmetnim dejavnikom. Rezultati so veljali za pomembne, ko je bil p < 0,05 za vse statistične teste. Rezultati so veljali za pomembne, ko je bil p < 0,05 za vse statistične teste. Rezultati so veljali za pomembne pri p < 0,05 za vse statistične teste. Rezultati so veljali za pomembne pri p < 0,05 za vse statistične teste.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Rezultati so veljali za pomembne pri p < 0,05 za vse statistične teste. Rezultati so veljali za pomembne pri p < 0,05 za vse statistične teste.
Slika 2 prikazuje eksperimentalno časovnico (slika 2A) in porazdelitev frekvence vseh podgan, ki so bile izpostavljene izumrtju (slika 2B). Podgane v skupinah z dobrim in slabim izumrtjem so se bistveno razlikovale v teh izračunanih rezultatih odpoklica izumrtja (U = 0, p <0,001) (slika 2C). Podgane v skupinah z dobrim in slabim izumrtjem so se bistveno razlikovale v teh izračunanih rezultatih odpoklica izumrtja (U = 0, p <0,001) (slika 2C). Krisi v skupinah z dobrim in slabim ugašanjem so se znatno razlikovali glede na te preučene kazalnike v spominu ugašanja (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). Podgane v skupinah z dobrim in slabim izumrtjem so se znatno razlikovale v teh izračunanih stopnjah priklica izumrtja (U=0, p<0,001) (slika 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异＂ (U = 0，p <0,001（图). 2C). U = 0， p <0,001） (图2C， V teh ocenjenih kazalcih so se spominjanja ugašanja krisi v skupinah z dobrim in slabim ugašanjem znatno razlikovali (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). V teh izračunanih stopnjah odpoklica izumrtja so se podgane v skupinah z dobrim in slabim izumrtjem znatno razlikovale (U = 0, p < 0,001) (slika 2C).Med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem in priklicem strahu med osnovnim obdobjem seje pogojnega refleksa s strahom ni bilo bistvene razlike v času zamrzovanja (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (slika 2D).Poleg tega med predstavitvijo prvega tona pogojnega refleksa strahu ni bilo bistvene razlike v času zamrznitve med skupinami z dobrim izumrtjem, slabšim izumrtjem in priklicem strahu (X2(2) = 1,107, p = 0,575), saj tudi med strahom med drugim tonom.Med kondicioniranjem je prišlo do pomembne razlike v času zamrzovanja med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem in priklicem strahu (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (slika 2D).Prav tako ni bilo pomembne razlike v času zbledenja med dobrimi in slabimi skupinami za izumrtje med osnovnim obdobjem usposabljanja za izumrtje (U = 45,00, p = 0,799) (slika 2D). Nato je prišlo do pomembnega glavnega učinka poskusnega bloka (5 ton na blok) na čas, porabljen za zamrzovanje med treningom ekstinkcije (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), kar kaže, da je prišlo do učenja ekstinkcije (slika 2D). ). Nato je prišlo do pomembnega glavnega učinka poskusnega bloka (5 ton na blok) na čas, porabljen za zamrzovanje med treningom ekstinkcije (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), kar kaže, da je prišlo do učenja ekstinkcije (slika 2D). ). Nato je bil opazen pomemben osnovni učinek poskusnega bloka (5 ton na blok) v času, ki se je zadrževal pri zapiranju v času treninga ugašanja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), kar kaže na to, da je prišlo do ugašenega usposabljanja ( ris. 2D). Nato je prišlo do pomembnega glavnega učinka poskusnega bloka (5 ton na blok) na čas, potreben za zamrznitev med treningom ekstinkcije (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), kar kaže, da je potekalo učenje ekstinkcije (slika 2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2,884，54,80）=8,3 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） .接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2,884，54,80）=8,3 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） . Nato so se v času usposabljanja povišali poskusni bloki (5 ton na blok) izkazali za znaten osnovni vpliv na čas zamirjanja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), kar kaže na to, da je prišlo do pomanjkanja usposabljanja (ris 2D). Nato so med učenjem ekstinkcije imeli poskusni bloki (5 tonov na blok) pomemben glavni učinek na čas umirjanja (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), kar kaže, da je potekalo učenje ekstinkcije (slika .2D). .Vendar skupina za izumrtje (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) ni imela pomembnega vpliva na čas zbledenja v celotnem obdobju usposabljanja za izumiranje in ni bilo interakcije med poskusnim blokom in skupino za izumiranje (F(4 , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (slika 2D). Med preskusno sejo je med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem in priklicem strahu prišlo do pomembne razlike v času, porabljenem za zamrzovanje v izhodiščnem obdobju (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), tako da je skupina, ki se je spomnila strahu, znatno zamrznila več kot dobra skupina za izumrtje (povprečna razlika v rangu = 10,57, p = 0,017), vendar ne skupina s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = − 3,714, p > 0,999) (slika 2D). Med preskusno sejo je med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem in priklicem strahu prišlo do pomembne razlike v času, porabljenem za zamrzovanje v izhodiščnem obdobju (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), tako da je skupina, ki se je spomnila strahu, znatno zamrznila več kot dobra skupina za izumrtje (povprečna razlika v rangu = 10,57, p = 0,017), vendar ne skupina s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = − 3,714, p > 0,999) (slika 2D).Med preskusno sejo je obstajala pomembna razlika med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem in skupinami, ki so se spomnile strahu, v času, porabljenem za zamrzovanje v izhodiščnem obdobju (X2(2) = 8,569, p = 0,014), tako da je skupina, ki se je spomnila strahu, zamrznila. bistveno .bolj kot v skupini dobrega dviga (srednja raznica rangov = 10,57, p = 0,017), vendar ne v skupini slabega dviganja (srednja raznica rangov = -3,714, p> 0,999) (ris. 2D). večja kot v skupini z dobrim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 10,57, p = 0,017), vendar ne v skupini s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = −3,714, p > 0,999) (slika 2D).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间方面存在显着差异(X2) (2) = 8,569，p = 0,014，因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组＄(平均秩差= – 3,714，p > 0,999）（图2D）).在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异（（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） ， 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差绝组，(平均秩差= – 3,714，p > 0,999）（图2D）). V obdobju testiranja je bila opažena pomembna razlika med skupino z dobrim ugašanjem, skupino s plohim ugašanjem in skupino s spominjanjem strahu s točkami pogleda na čas zamiranja na izhodiščni ravni (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), zato spominjanje strahu skupina zamerza precej veliko časa. , kot skupina z dobrim izmerjanjem (srednja raznica rangov = 10,57, p = 0,017), vendar ni skupina s plohim izmerjanjem (srednja raznica rangov = -3,714, p> 0,999) (ris. 2D). Med obdobjem testiranja je obstajala pomembna razlika med skupino z dobrim izumrtjem, skupino s slabim izumrtjem in skupino, ki se je spominjala strahu, kar zadeva čas zamrznitve na začetku (X2(2) = 8,569, p = 0,014), tako da je strah skupina zmrzne značilno pogosteje kot skupina z dobrim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 10,57, p = 0,017), ne pa tudi skupina s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = -3,714, p > 0,999) (slika 2D).Skupina z dobrim izumrtjem, skupina s slabim izumrtjem in skupina s priklicem strahu so imele tudi znatno različne čase zbledenja med predstavitvijo tona v testni seji (X2(2) = 14,93, p = 0,001), tako da je imela skupina z dobrim izumrtjem bistveno manj čas.čas zmrzovanja kot v skupini s šibkim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 9,286, p = 0,044) in skupini s spominom na strah (povprečna razlika v rangu = 13,86, p = 0,001) (slika 2D).
Individualne razlike v spominu na izumrtje.(A) Oris kirurških in vedenjskih postopkov.(B) Frekvenčna porazdelitev, ki kaže individualne razlike v rezultatih izginjajočega spomina.(C) Dokazi, da skupine, zasnovane na podlagi izračunanih rezultatov odpoklica izumrtja, predstavljajo dva različna fenotipa.(D) Povprečni odstotek časa, ko podgane zamrznejo za slabo izumrtje, dobro izumrtje in priklic strahu v 30-sekundnih celicah seje pogojnega refleksa strahu, v tonih 20, 30 s, strnjenih v 5 blokov med sejo učenja izumrtja (4 toni) .vsak) in v štirih tonih v seansah spominov bledenja in spominov strahu.Vrstice napak predstavljajo standardni odklon povprečja. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05，**p < 0,01，***p < 0,001，****p < 0,0001. *p < 0,05，**p < 0,01，***p < 0,001，****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Retrogradni indikator je bil vbrizgan v IL (slika 3A) in določeno je bilo število GFP+ celic vzdolž anteriorno-posteriorne osi interesne regije (slika 3B-F).Med sprednjo, srednjo in posteriorno PVT je bila značilna razlika v številu celic GFP+ (X2(2) = 8,200, p = 0,017), tako da je mPVT pokazala bistveno več celic GFP+ kot aPVT (srednji rang) Diff.= 18,37, p = 0,035) in pPVT (povprečna razlika v rangu = 17,71, p = 0,045) (slika 3C).Čeprav več živali ni zaznalo nobenih celic GFP+ v pCLA in zato niso mogle preslikati aktivnosti v tej regiji, ni bilo pomembne razlike med sprednjim, srednjim in zadnjim CLA (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Število celic GFP+ (slika 3D).Potem, ker je bilo nekaj celic GFP+ najdenih v aBLA ali avHPC pri več podganah, sta bila analizirana samo sredina in zadnji del teh področij.Srednji in posteriorni BLA (U=393, p=0,009) sta se bistveno razlikovali v številu celic GFP+, tako da je pBLA pokazala več projekcij IL kot mBLA (slika 3E).Podobno je obstajala pomembna razlika med srednjim in posteriornim vHPC, tako da so pvHPC pokazali več projekcij IL kot mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (slika 3F).Slika 3G je vzorčna slika, ki prikazuje Fos, aavRG-GFP in dvojno označene celice.
Kvantificirajte aferente IL v celotnem območju možganov, ki vas zanima.(A) Shematski prikaz porazdelitve aavRG-CAG-GFP v celi podganji IL.(B) Reprezentativne slike retrogradnih markerjev na različnih anteroposteriornih lokacijah v možganski regiji, ki nas zanima.Kvantifikacija retrogradnega označevanja vzdolž anteroposteriorne osi (C) paraventrikularni talamus, (D) ključnica, (E) bazolateralni tonzil in (F) ventralni hipokampus.(G) Reprezentativne slike, ki prikazujejo retrogradno označevanje aavRG, označevanje Fos in dvojno označevanje aavRG in Fos v aPVT.Vrstice napak predstavljajo standardni odklon povprečja. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Lestvica merila 100 µm.Zemljevid možganov v javni lasti na plošči A je reproduciran iz Swanson (2004) Zemljevid možganov: Struktura možganov podgan, 3. izdaja, licenciran pod mednarodno licenco Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/), ki je na voljo za prenos na https://larrywswanson.com.
Globalno in IL projekcijsko specifično aktivnost Fos smo analizirali v aPVT, mPVT in pPVT pri vseh podganah.Med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami v izražanju Fos v aPVT ni bilo pomembne razlike (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (slika 4A), niti ni bilo pomembne korelacije med Fos v aPVT med izražanjem in priklicem izumrtja (rs = 0,092, p = 0,691) (slika 4B) ali med izražanjem Fos v aferentih IL aPVT in priklicem izumrtja (rs = 0,143, p = 0,537) (slika 4D).Vendar pa se je v aPVT IL aferentih izražanje Fos pomembno razlikovalo med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami (X2(3) = 15,05, p = 0,002), tako da je skupina priklica strahu pokazala relativno dobro izumrtje.regresijska (povprečna razlika v rangu = 11,54, p = 0,003), slaba regresija (povprečna razlika v rangu = 10,57, p = 0,034) in skupine domačih celic (povprečna razlika v rangu = 12,79, p = 0,005) (slika 4C).Poleg tega ni bilo pomembne razlike med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami za izražanje Fos pri mPVT (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (slika 4E) in za izražanje Fos pri mPVT..Pomembna korelacija s spominom na izumrtje (rs = 0,168 p = 0,468) (slika 4F).Čeprav je obstajala pomembna razlika med dobrimi, slabimi, skupinami, ki se spominjajo strahu, in domačimi celičnimi skupinami v ekspresiji Fos v aferentnih IL celicah mPVT (X2(3) = 9,252, p = 0,026), post hoc primerjava ni razkrila nobenega ali dveh.Pomembne razlike med skupinami (slika 4G).Poleg tega ni bilo pomembne korelacije med izražanjem Fos v IL-aferentnih celicah mPVT in odpoklicem izumrtja (rs = 0,174, p = 0,450) (slika 4H). Nato je prišlo do pomembne razlike med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi kletkami v izražanju Fos v pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako da je bila skupina z dobrim izumrtjem (povprečni rang Diff. = 14,96, p = 0,010), vendar ne slaba ekstinkcija (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ali skupina s priklicem strahu (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), je pokazala več izraza Fos kot skupina skupina domačih kletk (slika 4I). Nato je prišlo do pomembne razlike med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi kletkami v izražanju Fos v pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako da je bila skupina z dobrim izumrtjem (povprečni rang Diff. = 14,96, p = 0,010), vendar ne slaba ekstinkcija (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ali skupina s priklicem strahu (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), je pokazala več izraza Fos kot skupina skupina domačih kletk (slika 4I). Nato je bila opazna pomembna razlika med skupinami z dobrim ugašanjem, slabim ugašanjem, oceno strahu in domače kletke v ekspresiji Fos v pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako da skupina z dobrim ugašanjem (srednji rang Diff. = 14,96, p = 0,010), vendar ni v skupini slabih ugašenj (srednja rangova raznica = 12,86, p = 0,113) ali skupina spominov o strahu (srednja rangova raznica = 2,571, p > 0,999), pokazala se je bolj izraženа eksпрессия Fos, kot v skupini skupine domačih celic (ris. 4I). Poleg tega je obstajala pomembna razlika med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami v izražanju Fos v pPVT (X2(3)=13,89, p=0,003), tako da je bila skupina dobrega izumrtja (povprečni rang Diff. = 14,96, p = 0,010), vendar ne v skupini s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 12,86, p = 0,113) ali skupini s spominom na strah (povprečna razlika v rangu = 2,571, p > 0,999), je pokazala izrazitejšo ekspresijo Fos kot v skupino domačih celic (slika 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13,89 ， p = 0,003） 使得 消组 （（povprečna razlika v rangu.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(povprečna razlika v rangu = 12,86, p = 0,113) 或恐惧回忆组(povprečna razlika v rangu = 2,571, p > 0,999)，比家庭笼组（图4I ).= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Povprečna razlika v rangu = 12,86, p = 0,113)).Drugič, obstajale so pomembne razlike v izražanju Fos v pPVT med dobrimi, slabimi skupinami, skupinami s priklicem strahu in domačimi celicami (X2(3) = 13,89, p = 0,003), zaradi česar je bila skupina z dobrim vnosom (povprečna razlika v rangu = 14,96)., p = 0,010), vendar ni huje po zmanjšanju (srednja raznica rangov = 12,86, p = 0,113) ali skupina odzivov strahu (srednja raznica rangov = 2,571, p > 0,999), kot v skupini domačih celic (ris. 4I) . , p = 0,010), vendar nič slabše pri izumrtju (povprečna razlika v rangu = 12,86, p = 0,113) ali skupini s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 2,571, p > 0,999) kot skupina domačih celic (slika 4I)..Vendar ni bilo pomembne korelacije med ekspresijo pPVT Fos in odpoklicem izumrtja (rs = 0,051, p = 0,825) (slika 4J).Končno je obstajala pomembna razlika v izražanju Fos v aferentih pPVT IL med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, spomini na strah in v domačih celicah (X2(3) = 12,34 p = 0,006), tako da je bilo dobro izražanje Fos v IL- slabši kot v skupinah z izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 12,54, p = 0,014) in v domači celici (povprečna razlika v rangu = 12,89, p = 0,049) (slika 4K) in značilno koreliran z aferenti IL znotraj pPVT Med aktivacijo in preklic izumrtja je bil boljši priklic izumrtja povezan z večjo aktivacijo teh aferentov IL (rs = -0,438, p = 0,047) (slika 4L).
Aktivnost Fos je bila povečana v aferentih IL posteriornega paraventrikularnega talamusa (PVT) pri podganah, kar je pokazalo dobro regresijo.(A) Med skupinami ni bilo pomembnih razlik v izražanju Fos pri aPVT.(B) Med izražanjem Fos in odpoklicem izumrtja pri aPVT ni bilo pomembne korelacije.(C) Skupina s priklicem strahu je pokazala povečano izražanje Fos v aferentih IL v primerjavi z vsemi drugimi skupinami.(D) Med izražanjem Fos v aferentih IL in odpoklicem izumrtja pri aPVT ni bilo pomembne korelacije.(E) V izražanju Fos pri mPVT ni bilo pomembnih razlik med skupinami.(F) Med ekspresijo Fos in spominom na izumrtje pri mPVT ni bilo pomembne korelacije.(G) Ekspresija Fos v aferentnih celicah IL pri mPVT se med skupinami ni bistveno razlikovala.(H) Med izražanjem Fos v aferentih IL in odpoklicem izumrtja pri mPVT ni bilo pomembne korelacije.(I) Dobro izumrla skupina, vendar nobena druga skupina, je pokazala povečano aktivnost Fos v pPVT v primerjavi s skupino v domači kletki.(J) Med izražanjem Fos in odpoklicem izumrtja pri pPVT ni bilo pomembne korelacije.(K) Skupina z dobrim izumrtjem je pokazala povečano izražanje Fos v aferentnih celicah IL v primerjavi s skupino s šibkim izumrtjem in skupino domačih celic.(L) Obstaja pomembna korelacija med izražanjem Fos v aferentih IL in priklicem izumrtja, tako da je dober priklic izumrtja povezan z večjim izražanjem Fos v aferentih IL.Vrstice napak predstavljajo standardni odklon povprečja. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Globalno in za projekcijo IL specifično aktivnost Fos v aCLA in mCLA podgan smo nato analizirali v vseh skupinah. Obstajala je pomembna razlika med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi kletkami v izražanju Fos v aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), tako da je skupina s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,50, p = 0,049), vendar niti revne (povprečna razlika v rangu = 10,21, p = 0,373) niti skupine z dobrim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 4,607, p > 0,999) niso pokazale več izražanja Fos kot skupina v domači kletki ( Slika 5A). Obstajala je pomembna razlika med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi kletkami v izražanju Fos v aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), tako da je skupina s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,50, p = 0,049), vendar niti revne (povprečna razlika v rangu = 10,21, p = 0,373) niti skupine z dobrim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 4,607, p > 0,999) niso pokazale več izražanja Fos kot skupina v domači kletki ( Slika 5A). Med skupinami z dobrim ugašanjem, plohim ugašanjem, spominjanjem strahu in domačimi celicami je bila opazna pomembna razlika v ekspresiji Fos v aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), tako kot skupina spomina strahu (srednje rangovo razliko = 14,50, p = 0,049), no ni ploha (srednja rangova raznica = 10,21, p = 0,373), ni skupina z dobrim izmerjanjem (srednja rangova raznica = 4,607, p > 0,999) ni pokazala večje ekspresije Fos, kot je skupina v domači kletki ( Slika 5A). Obstajala je pomembna razlika v izražanju aCLA Fos med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celicami (X2(3) = 8,455, p = 0,036), tako da je skupina s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,50, p = 0,049), vendar niti revna (povprečna razlika v rangu = 10,21, p = 0,373) niti skupina z dobrim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 4,607, p > 0,999) nista pokazali več izražanja Fos kot skupina domačih celic (slika .5A) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异(X2 (3) = 8,455, p = 0,036)，因此恐惧回忆组(povprečna razlika v rangu = 14,50，p = 0,049，但无论是差，(平均秩差= 10,21，p = 0,373）还是良好灭绝，(平均秩差= 4,607，p > 0,999），都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (povprečje Razlika v rangu = 14,50 ， P = P = P = P = 14. 0,049， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， p = 0,373） 良好 灭绝 （平均 秩差 秩差 = 4.607 ， p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Bila pomembna razlika med skupinami z dobrim ugašanjem, slabim ugašanjem, oceno strahu in domačo kletko po ekspresiji Fos v aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), zato je skupina ocenila strah (srednje rangovo razliko = 14,50) , p = 0,049), vendar skupina s plohim (srednja raznica rangov = 10,21, p = 0,373) in z dobrim merjenjem (srednja raznica rangov = 4,607, p > 0,999) je pokazala bolj visoko ekspresijo Fos, kot skupina z domačo kletko (ris. 5A). Pri izražanju aCLA Fos (X2(3) = 8,455, p = 0,036) je bila značilna razlika med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami (X2(3) = 8,455, p = 0,036), torej skupino s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,50), p = 0,049 ), vendar so skupine s slabim (povprečna razlika v rangu = 10,21, p = 0,373) in dobrim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 4,607, p > 0,999) pokazale višjo ekspresijo Fos kot skupina domačih celic (slika 5A). .Med globalno ekspresijo Fos v (rs = 0,036, p = 0,876) (slika 5B) ali ekspresijo Fos v aferentnih celicah IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) in odpoklicem izumrtja (slika 5B) ni bilo pomembne korelacije..5D), prav tako ni bilo pomembne razlike med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami v izražanju Fos v aferentih aCLA IL (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (slika 5C)..). Nato je prišlo do pomembne razlike med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in skupinami v domači kletki v izražanju Fos v mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), tako da je skupina z dobrim izumrtjem (povprečna razl. . = 12,93, p = 0,038), vendar niti skupine s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 5,143, p > 0,999) niti skupine s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,00, p = 0,063) niso pokazale bistveno večjega izražanja Fos v mCLA. glede na skupino domačih kletk (slika 5E). Nato je prišlo do pomembne razlike med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in skupinami v domači kletki v izražanju Fos v mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), tako da je skupina z dobrim izumrtjem (povprečna razl. . = 12,93, p = 0,038), vendar niti skupine s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 5,143, p > 0,999) niti skupine s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,00, p = 0,063) niso pokazale bistveno večjega izražanja Fos v mCLA. glede na skupino domačih kletk (slika 5E). Nato je opazila pomembno razliko med skupinami z dobrim ugašanjem, plohim ugašanjem, spomini o strahu in domači kletki v ekspresiji Fos v mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), tako da skupina z dobrim ugašanjem (srednja raznica) rangov = 12,93, p = 0,038), vendar ni skupina slabih ugasnitev (srednja rangova raznica = 5,143, p > 0,999), niti skupina ocene strahu (srednja rangova raznica = 14,00, p = 0,063) ni pokazala bistveno večjega. ekspresije Fos v mCLA. Nato je bila značilna razlika med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, spomini na strah in domačimi celičnimi skupinami v izražanju mCLA Fos (X2(3) = 10,12, p = 0,018), tako da je skupina z dobrim izumrtjem (povprečni rang razlike = 12,93, p = 0,038), vendar niti skupine s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 5,143, p > 0,999) niti skupine s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,00, p = 0,063) niso pokazale bistveno večjega izražanja Fos v mCLA.v primerjavi s skupino domačih kletk (slika 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 ＂ (x2 （3） = 10,12 ， p = 0,018） ， 良好 （（（（（（ （（（ Povprečna razlika v rangu.= 12,93, p = 0,038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回忆组＄(平均秩差= 14,00) ，p = 0,063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组 (图5E). = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， p> 0,999） 和 回忆组 （平均 秩差 = 14,00 ， p = 0,063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Nato je v ekspresiji Fos v mCLA opazila pomembno razliko med skupino z dobrim ugasanjem, skupino s plohim ugasanjem, skupino z oceno o strahu in skupino z domačo kletko (X2(3) = 10,12, p = 0,018), torej skupina dobra ugašanja (srednja raznost rangov = 12,93, p = 0,038), vendar v mCLA ni slabo ugašanje (srednja raznica rangov = 5,143, p > 0,999), ni skupina odzivov na strah (srednja raznica rangov = 14,00, p = 0,999) = 0,063) je pokazal boljši izraz Mnogo Fos v primerjavi s skupino z domačo kletko (Рисунок 5E). Poleg tega je obstajala pomembna razlika v izražanju Fos v mCLA med skupino z dobrim izumrtjem, skupino s slabim izumrtjem, skupino s povratnimi informacijami o strahu in skupino domačih celic (X2(3) = 10,12, p = 0,018), torej dobro izumrtje (povprečna razlika v rangu = 12,93, p = 0,038), vendar v mCLA niti šibka ekstinkcija (povprečna razlika v rangu = 5,143, p > 0,999) niti skupina s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 14,00, p = 0,999) = 0,063) nista pokazali boljšega Ekspresija Multi Fos v primerjavi s skupino domačih celic (slika 5E).Vendar pa globalna ekspresija Fos v mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (slika 5F) ali v aferentnih celicah IL mCLA (rs = -0,121, p = 0,602) in odpoklic izumrtja (slika 5H) ni pomembne razlike med skupine z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačo celico za izražanje Fos v aferentnih celicah IL mCLA (X2(3)=4,923, p=0,178) (slika 5G).
Aktivnost fos je bila povišana v srednjem klavstrumu pri podganah z dobrim spominom na izumrtje.(A) Skupina, ki se je spomnila strahu, vendar ne druge skupine, je pokazala povečano aktivnost Fos v primerjavi s skupino domačih celic v aCLA.(B) Med izražanjem Fos v aCLA in odpoklicem izumrtja ni bilo pomembne korelacije.(C) Ekspresija Fos v IL aferentnih celicah aCLA se med skupinami ni bistveno razlikovala.(D) Med izražanjem Fos v aferentih IL in odpoklicem izumrtja v aCLA ni bilo pomembne korelacije.(E) Dobro izumrla skupina, vendar ne druge skupine, je pokazala povečano aktivnost Fos v mCLA v primerjavi s skupino domačih celic.(F) Med izražanjem Fos in odpoklicem izumrtja v mCLA ni bilo pomembne korelacije.(G) Ekspresija Fos v aferentnih celicah IL mCLA se med skupinami ni bistveno razlikovala.(H) Ni bilo pomembne korelacije med izražanjem Fos v aferentih IL in odpoklicem izumrtja v mCLA.Vrstice napak predstavljajo standardni odklon povprečja. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.
Nato smo v vseh skupinah podgan analizirali globalno in IL projekcijsko specifično aktivnost Fos v mBLA in pBLA.Pri izražanju Fos v mBLA (X2(3)=0,944, p=0,815) ni bilo pomembne razlike med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami (slika 6A).Prav tako ni bilo pomembne razlike med skupinami z dobro regresijo, slabo regresijo, priklicem strahu in izražanjem Fos v domači celici v aferentnih celicah IL mBLA (X2(3)=0,518, p=0,915) (slika 6C).Poleg tega ni bilo pomembne korelacije med globalno ekspresijo Fos v mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (slika 6B) in ekspresijo Fos v aferentnih celicah IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Slika 6D) in odpoklic izumrtja.Prav tako ni bilo pomembne razlike pri dobrem izumrtju, slabem izumrtju, spominu na strah in domačih celičnih skupinah v izražanju Fos v pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (slika 6E), prav tako ni bilo pomembne razlike v pBLA Dobro.izumrtje, slabo izumrtje, priklic strahu in domače celične skupine v izražanju Fos v aferentnih celicah IL (X2(3)=1,954, p=0,582) (slika 6G).Končno, globalna ekspresija Fos v pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (slika 6F) in ekspresija Fos v aferentnih celicah pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) in odpoklic izumrtja (slika 6H).
Individualne razlike v reprodukciji izumrtja niso bile preslikane na razlike v izražanju Fos v bazolateralni amigdali.(A) V izražanju Fos v mBLA ni bilo pomembnih razlik med skupinami.(B) Med ekspresijo Fos in odpoklicem izumrtja v mBLA ni bilo pomembne korelacije.(C) Ekspresija Fos v aferentnih celicah IL mBLA se med skupinami ni bistveno razlikovala.(D) Med ekspresijo Fos v aferentnih celicah IL in odpoklicem izumrtja v mBLA ni bilo pomembne korelacije.(E) V izražanju Fos v pBLA ni bilo pomembnih razlik med skupinami.(F) Med ekspresijo Fos in odpoklicem izumrtja v pBLA ni bilo pomembne korelacije.(G) Ekspresija fos v aferentnih celicah IL pBLA se med skupinami ni bistveno razlikovala.(H) Med izražanjem Fos v aferentnih celicah IL in odpoklicem izumrtja v pBLA ni bilo pomembne korelacije.Vrstice napak predstavljajo standardni odklon povprečja.
Končno, globalno in IL projekcijsko specifično aktivnost Fos smo analizirali v mvHPC in pvHPC pri vseh podganah. Pri izražanju Fos v mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) je bila pomembna razlika med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi kletkami, tako da je dobro izumrtje (povprečna razlika v rangu = 13,29 , p = 0,031), vendar niti skupine s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 6,857, p > 0,999) niti priklic strahu (povprečna razlika v rangu = 8,000, p = 0,864) niso pokazale več izražanja Fos kot skupina v domači kletki (sl. 7A). Pri izražanju Fos v mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) je bila pomembna razlika med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi kletkami, tako da je dobro izumrtje (povprečna razlika v rangu = 13,29 , p = 0,031), vendar niti skupine s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 6,857, p > 0,999) niti priklic strahu (povprečna razlika v rangu = 8,000, p = 0,864) niso pokazale več izražanja Fos kot skupina v domači kletki (sl. 7A). Med skupinami z dobrim ugašanjem, slabim ugašanjem, oceno strahu in domačimi celicami je bila opažena pomembna raznica v ekspresiji Fos v mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), tako da je dobro ugašanje (srednja rangova raznica = 13,29) , p = 0,031), vendar ni v skupini s plohim ugašanjem (srednja rangova skupina = 6,857, p > 0,999), ni v skupini z oceno strahu (srednja rangova skupina = 8,000, p = 0,864) izražanje Fos je bilo višje, kot je bilo v skupini z domačo kletko (ris. 7А). Med skupinami z dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celicami je bila pomembna razlika v izražanju mvHPC Fos (X2(3) = 8,056, p = 0,045), torej dobra ekstinkcija (povprečna razlika v rangu = 13,29), p = 0,031), vendar niti v skupini s slabim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 6,857, p > 0,999) niti v skupini s priklicem strahu (povprečna razlika v rangu = 8,000, p = 0,864) izražanje Fos ni bilo višje kot v domači skupini.celico (slika 7A). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异＂ (X2 (3) = 8,056, p = 0. 045，因此良好消退（平均秩差= 13,29） ，p = 0,031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6,857，p > 0,999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8,000，p = 0,864）组都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。 mvhpc 中 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8. 056, p = 0,045） ， 良好 （（(平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031 ） ， 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 ， p> 0,999） 还是 恐惧 （平均 秩差 秩差 = 8,000 ， p = 0,864） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。。 ）))))))))))))))）))))))))))) Imela je pomembno razliko med skupinami «dobro», «ploho», «pripominjanje strahu» in «domača celica» za ekspresijo Fos v mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) in, posledično, dobra regresija (srednja raznica rangov = 13,29), p = 0,031), vendar skupine s šibkim ugašanjem (srednja stopnja rangov = 6,857, p > 0,999) in spomini na strah (srednja lestvica rangov = 8,000, p = 0,864) so ​​pokazale bolj visoko ekspresijo Fos, kot skupina v domače kletke (ris. 2). Obstajala je pomembna razlika med dobrimi, slabimi, skupinami, ki se spominjajo strahu, in domačimi celicami za izražanje Fos v mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) in zato dobra regresija (povprečna razlika v rangu = 13,29), p = 0,031), vendar so skupine s šibkim izumrtjem (povprečna razlika v rangu = 6,857, p > 0,999) in spomini na strah (povprečna razlika v rangu = 8,000, p = 0,864) pokazale višjo ekspresijo Fos kot skupina v domači kletki (slika 2).7A).Vendar pa ni bilo pomembne razlike (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (slika 7C).Poleg tega ni bilo pomembne korelacije med globalno ekspresijo Fos v mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (slika 7B) in ekspresijo Fos v aferentnih IL celicah mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (slika 7D).in poročilo o izginotju.Poleg tega ni bilo pomembne razlike med dobrim izumrtjem, slabim izumrtjem, priklicem strahu in domačimi celičnimi skupinami v izražanju Fos v pvHPC (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (slika 7E) in ni bilo pomembnih razlik.razlika v dobri regresiji izražanja Fos v pvHPC aferentnih celicah IL, slabi regresiji, spominu na strah in domačih celičnih skupinah (X2(3)=3,871, p=0,276) (slika 7G).Končno ni bilo pomembne korelacije med pvHPC globalno ekspresijo Fos (rs = -0,127, p = 0,584) (slika 7F) in ekspresijo Fos v IL-aferentnih celicah pvHPC (rs = 0,176, p = 0,447) in odpoklicem izumrtja (slika 7F). ).7H).
Izražanje fos je povečano v ventralnem hipokampusu podgan, kar kaže na dobro izumrtje spomina.(A) Dobro izumrla skupina, vendar ne druge skupine, je pokazala povečano izražanje Fos v mvHPC v primerjavi s skupino domačih celic.(B) Med izražanjem Fos in odpoklicem izumrtja pri mvPHC ni bilo pomembne korelacije.(C) Ekspresija Fos v aferentnih IL celicah mvHPC se med skupinami ni bistveno razlikovala.(D) Med izražanjem Fos v aferentih IL in odpoklicem izumrtja v mvHPC ni bilo pomembne korelacije.(E) Med skupinami ni bilo pomembnih razlik v izražanju Fos v pvHPC.(F) Med izražanjem Fos in odpoklicem izumrtja pri pvHPC ni bilo pomembne korelacije.(G) Ekspresija Fos v pVHPC aferentnih IL celicah se med skupinami ni bistveno razlikovala.(H) Med izražanjem Fos v aferentih IL in odpoklicem izumrtja pri pvHPC ni bilo pomembne korelacije.Vrstice napak predstavljajo standardni odklon povprečja. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.Naša primarna analiza za vse regije je pokazala primerjavo na treh ravneh vzdolž anteroposteriorne osi, čeprav smo analizirali tudi vsako regijo, ki se je zrušila vzdolž anteroposteriorne osi.Rezultati teh analiz so predstavljeni v tabeli 1.
Tukaj smo testirali, ali bi se posamezne razlike v spominu na izumrtje odrazile v različnih vzorcih aferentne aktivnosti v spodnji limbični skorji.V ta namen smo ocenili aktivnost Fos v projekcijah IL iz paraventrikularnega talamusa, klaustruma, bazolateralnega tonzila in ventralnega hipokampusa po ponovitvi izumrtja.V celicah, ki projicirajo IL, smo ugotovili višjo aktivnost v zadnji regiji PVT pri podganah, ki so pokazale dober spomin na izumrtje v primerjavi s podganami s slabim izumrtjem.Ni bilo razlik v aferentih IL iz klavikularnega jedra, ventralnega hipokampusa ali bazolateralnega tonzila.Poleg celic, ki projicirajo IL, so opazili povečano nevronsko aktivnost v izbranih območjih klaustruma podgane in ventralnega hipokampusa z dobro ločljivostjo.Naši rezultati kažejo, da je uspešen spomin na izumrtje organiziran s specifičnimi projekcijami PVT na IL in ne-IL ciljne celice v klavstrumu in ventralnem hipokampusu.
Ugotovili smo, da je bilo napovedovanje PVT IL aktivno pri podganah, ki so pokazale dober odpoklic izumrtja, kar je skladno z nedavno študijo, ki je pokazala, da je PVT potreben za odpoklic izumrtja.Ta študija ni uporabila manipulacij, specifičnih za podregijo, vendar je pokazala, da so bile za reprodukcijo izumrtja potrebne tako PVT projekcije na lateralni osrednji amigdali kot IL projekcije na PVT.Naši rezultati kažejo, da je poleg verige IL-PVT-CeL morda potreben tudi vstop po PVT v IL za odpoklic dušenja.Tako se izkaže, da so tako eferentne kot aferentne povezave IL vključene v reprodukcijo izumrtja.Pomemben naslednji korak je ugotoviti, kaj povzroča, da pPVT signalizira reprodukcijo izumrtja na ravni nevronskega vezja.Poleg povezave z IL so prejšnje študije sledenja kanalom31,32 pokazale, da pPVT prejema vnos iz ventralnega periakveduktalnega sivega (vPAG), ki je povezan z učenjem izumrtja33,34,35,36.Čeprav vloga vPAG pri odpoklicu izumrtja ni bila ugotovljena, je napoved pPVT z vPAG privlačen kandidat zaradi njihove gostote in vpletenosti obeh regij v ustvarjanje predhodnih dokazov o izumrtju strahu.
Drug pomemben vidik naših rezultatov PVT je, da so specializirani vzdolž svoje anteriorno-posteriorne osi.Presenetljivo je, da nevronska aktivnost projekcije PVT v IL korelira z nasprotnim vedenjskim stanjem, tako da je aktivnost projekcije pred PVT v IL povezana s priklicem strahu, medtem ko je projekcija pPVT aktivna po uspešnem izumrtju priklica (tj. strahu).Ta funkcionalna heterogenost znotraj PVT ni presenetljiva glede na prejšnje delo [razpravljano v 37].Osupljiv primer funkcionalne porazdelitve pri PVT se je nedavno pojavil v študiji, ki je okarakterizirala lastnosti specifičnih vrst celic pri PVT.Ta študija kaže, da so dopaminske celice, ki izražajo DRD2, pretežno izražene v pPVT, inervirajo skorjo sprednjih okončin in se odzivajo na averzivne dražljaje.Druga celična populacija je pretežno izražena v aPVT in označuje prehod v stanje nizkega fiziološkega vzburjenja ter inervira korteks spodnjih okončin.Naši rezultati se komaj ujemajo s tem vzorcem, saj so celice aPVT, ki projicirajo IL, aktivne med odpoklicem strahu, medtem ko so projekcije pPVT aktivne in živali kažejo nizko stopnjo strahu.Obstajata vsaj dve možni razlagi za očitno neskladje.Prvič, identificirani tipi celic se ne nahajajo izključno na enem sprednjem in posteriornem mestu TVV.Tako lahko aktivne celice pPVT, ki projicirajo IL, pri podganah z dobrim spominom na izumrtje pripadajo razredu celic, za katere je verjetneje, da jih bodo odkrili v aPVT in signalizirajo prehod v stanje nizke vzburjenosti.Enako lahko velja za celice, ki projicirajo IL, v aPVT, ki se aktivira po spominu na strah.Drugič, prejšnje študije sledenja so odkrile prisotnost pPVT, ki projicirajo IL3, čeprav se zdi, da nekateri izhajajo iz celic, ki vsebujejo DRD2, lahko drugi tipi celic projicirajo na IL in se aktivirajo po uspešni reprodukciji gašenja.
Čeprav je bil cilj te študije ugotoviti razlike med podganami, ki kažejo različne fenotipe izumrtja, so ti poskusi razkrili tudi nove podatke, povezane z mehanizmi spomina na strah.Zanimivo je, da smo ugotovili povečano aktivnost Fos na sprednjem delu CLA pri podganah s spominom na strah.
Ključnica je postavljena kot središče kortikalne komunikacije in je vključena v procese, ki segajo od senzorične integracije do pozornosti in spanja40,41,42,43.Obstaja malo dokazov o tem, kako je klavstrum vključen v pogojevanje strahu ali izražanje strahu, vendar so prejšnje raziskave pokazale, da je kontekstualno izražanje strahu vključeno v aktivnost Fos v klavstrumu.Pred kratkim so poročali, da zaviranje projekcij atrezije na entorhinalni korteks med kontekstualnim pogojevanjem strahu poslabša oblikovanje dolgoročnega spomina, čeprav njihova potreba po izražanju strahu ni bila testirana.V isti študiji so opazili povečano aktivacijo Fos, ko so bile živali izpostavljene novemu okolju v primerjavi z mišmi, ki so bile izpostavljene znanemu okolju.S tem v mislih je aktivacija CLA, o kateri tukaj poročamo, morda posledica izpostavljenosti novi kameri med testiranjem in ne strahu pred samim odpoklicem.Za natančnejšo opredelitev funkcije ključavnic pri strahu in situacijski obdelavi bi morale prihodnje študije uporabiti ciljno manipulacijo ključavnic.
Čeprav je prejšnje delo pokazalo, da je PVT povezana z izražanjem spomina na strah, 45, 46, 47 nismo opazili nobene spremembe skupnega izražanja Fos pri podganah, ko so se spomnile strahu 48 ur po kondicioniranju.To razliko je mogoče razložiti z več dejavniki, vključno s predhodnim testiranjem strahu pred diskretnimi znaki v istem kontekstu, v katerem je potekalo kondicioniranje, medtem ko je bilo v našem poskusu testiranje opravljeno v novi sobi.Poleg tega smo naše živali evtanazirali 60 minut po testiranju, medtem ko je prejšnje delo uporabilo časovno točko 90 minut.Nazadnje, v prejšnjih študijah je bil test izveden v prostoru, kjer so se živali lahko odzvale z apetitom, medtem ko so bile pri našem delu podgane testirane brez odziva na apetit.Medtem ko to omogoča določeno stopnjo pogojne inhibicije, obstajajo dokazi, da dovolitev živalim, da zavirajo pritisk za pridobivanje hrane, medtem ko preizkušajo, ali se bojijo znakov, ustvarja motivacijski konflikt (tj. strah proti nagradi), ki je ključni spodbujevalni dejavnik.udeležba PVT48, 49. .
Znano je, da je bazolateralna amigdala vključena v pridobivanje izumrtja strahu50,51 in obstajajo dokazi, da so v ta proces vključene tudi projekcije BLA na IL23.Vendar ni jasno, ali so BLA in njegove povezave vpletene v vrnitev izumrtja.Študije slikanja 23, 28 so pokazale povečano aktivnost BLA pri živalih, ki prikličejo zbledele spomine.Medtem ko naše prejšnje delo ni pokazalo razlike v aktivaciji BLA med dobrimi in slabimi izumrtimi podganami, naši rezultati tukaj kažejo, da odpoklic izumrtja na splošno ne vpliva na BLA ali aktivacijo pri napovedovanju BLA IL.V skladu z našimi ugotovitvami, čeprav študije manipulacije vezja kažejo, da so vnosi IL v BLA pomembni za učenje izumrtja, niso potrebni za odpoklic izumrtja.Vendar vloge BLA ni mogoče popolnoma prezreti, saj nedavni dokazi kažejo, da so nekatere vrste celic v BLA potrebne za reprodukcijo izumrtja.
Predvsem priklic strahu ni povzročil aktivacije Fos v BLA, saj so prejšnje študije lezij, zdravil in slikanja to področje vpletle v izražanje strahu in/ali ponovno utrjevanje strahu po pridobitvi 54,55,56,57.Tukaj predstavljeni podatki združujejo bazalno in lateralno podjedro amigdale, prejšnji podatki pa kažejo, da izražanje strahu poganja aktivnost Fos na hrbtni strani lateralnega jedra.Ločeno smo analizirali osnovne in stranske podatke, vendar v obeh primerih ni bilo nobene razlike (podatki niso prikazani) in obe področji sta se v podatkih, ki jih predstavljamo tukaj, zrušili.Podregij lateralne amigdale nismo analizirali, zato so lahko specifične spremembe na tem področju prikrite.Druga možnost, da se aktivnost Fos pri BLA ne spremeni, je posledica časovne razporeditve spominov strahu v primerjavi s kondicioniranjem.Nekatera prejšnja dela so pokazala, da se prispevek BLA k izražanju strahu zmanjšuje s časom po kondicioniranju, tako da je izražanje BLA odvisno 24 ur po kondicioniranju, neodvisno pa 7 dni (ref. 45, vendar glej 58).prišlo 48 ur po treningu, zaradi česar pomanjkanje sprememb v aktivnosti Fos v tem trenutku verjetno odraža časovno odvisne spremembe v sodelovanju BLA pri izražanju strahu.
Končno najdemo dokaze, da je uspešen spomin na izumrtje povezan z ventralnim hipokampusom.To je značilno za "vmesne" vHPC, saj enak vzorec ni bil viden v posteriorni regiji.V skladu s prejšnjim delom nismo našli nobene spremembe v aktivaciji Fos v aferentnih vHPC IL.Obstaja veliko dokazov, da je vHPC28, 60, 61 potreben za aktualizacijo strahu, ko se CS pojavi zunaj konteksta, v katerem pride do bledenja, in da je to vsaj delno odvisno od vstopa vHPC v IL13.Na podlagi teh prejšnjih rezultatov bi pričakovali, da bo slabo bledenje povezano s povečano predvideno aktivnostjo IL vHPC.Vendar temu ni bilo tako, saj ni bilo razlike v aktivnosti Fos v IL-projiciranih retrogradno označenih vHPC ali neoznačenih celicah v vHPC.To nakazuje, da lahko nezmožnost spominjanja bledenja v kontekstu bledenja sproži drugačen mehanizem kot strah pred obnovo.
Pomembno je opozoriti na nekatere inherentne omejitve načrtovanja in analize ter kako vplivajo na naše zaključke.Najprej smo živali razdelili na zgornjo in spodnjo tretjino, miši pa na "dobre" in "slabe" glede na rezultate priklica izumrtja.To se naredi, da bi se izognili skupinskim shemam, ki delijo živali v ločene skupine iz sredine porazdelitve, ali skupinskim shemam, ki živali izključujejo iz sredine porazdelitve, kot je ločevanje po mediani ali primerjava zgornje in spodnje tretjine podgan .tej situaciji se želimo izogniti, ker mediana delitev ne odraža variabilnosti človeških odzivov na travmo, ki jih poskušamo modelirati.Poleg tega, čeprav nam primerjava zgornje in spodnje tretjine podgan omogoča primerjavo skupin podobne velikosti, ta pristop ignorira živali v središču porazdelitve in ne odraža natančno variabilnosti v reakcijah na poškodbo.Čeprav lahko naša metoda trpi zaradi težav s heterogeno varianco in primerjavo skupin z neenakimi velikostmi vzorcev, zajame, kar poskušamo posnemati, bolje kot alternativne metode.
Tu predstavljeni rezultati nam pomagajo bolje razumeti, kako se individualne razlike v spominu na izumrtje odražajo v razlikah v aktivnosti nevronskih vezij.Naše ugotovitve so lahko pomembne za posttravmatsko stresno motnjo, za katero je znano, da je povezana s pretiranim strahom in nezmožnostjo odpravljanja odzivov na strah.Pokažemo, da so razlike v spominu na izumrtje povezane z razlikami v intrinzični in ekstrinzični nevronski aktivnosti, projicirani na IL.Te razlike so bile porazdeljene po različnih regijah vzdolž anteroposteriorne osi, kar je dodatno poudarilo pomen ocenjevanja delovanja možganov na subregionalni ravni.Slabosti sedanje metode vključujejo relevantnost študije in osredotočenost na samce glodalcev.Prihodnje raziskave bi morale določiti nevrobiološke mehanizme, na katerih temelji učenje izumrtja pri samicah glodalcev, in uporabiti metode za ustvarjanje vzročnih sklepov.
Podatkovni nizi, uporabljeni in/ali analizirani v trenutni študiji, so na voljo pri zadevnih avtorjih na razumno zahtevo.
Pavlov IP Kondicioniranje: študija fiziološke aktivnosti možganske skorje.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO in Davis, M. Uporaba učnih načel pri zdravljenju posttravmatskih reakcij. Rothbaum, BO in Davis, M. Uporaba učnih načel pri zdravljenju posttravmatskih reakcij.Rotbaum BO in Davis M. Uporaba načel učenja pri zdravljenju posttravmatskih reakcij.Rotbaum BO in Davis M. Uporaba načel učenja pri zdravljenju posttravmatskih reakcij.namestite.New York College.znanost.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izpostavljenosti: zlati standard za zdravljenje PTSM. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izpostavljenosti: zlati standard za zdravljenje PTSM.Rauch SA, Eftekhari A. in Ruzek DI Pregled terapije izpostavljenosti: zlati standard zdravljenja posttravmatske stresne motnje. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izpostavljenosti: Zlati standard za zdravljenje PTSM.Rauch, SA, Eftekhari, A. in Ruzek, DI Pregled terapije izpostavljenosti: zlati standard zdravljenja posttravmatske stresne motnje.J. Rehabilitacija.razvoj rezervoarja 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Terapija z dolgo izpostavljenostjo: preteklost, sedanjost in prihodnost.Represija anksioznosti 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
G. Millard et al.Eksistencialni in pridobljeni vzroki za izgubo spomina pri posttravmatski stresni motnji: ugotovitve iz študije dvojčkov.J. Psihiater.rezervoar za shranjevanje.42 (7), 515-520 (2008).
G. Millard et al.Nevrobiološka osnova nezmožnosti priklica bledečih spominov pri posttravmatski stresni motnji.biologija.Psihologija.66 (12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike v strahu: izolacija reaktivnosti strahu in fenotipov okrevanja strahu. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike v strahu: izolacija reaktivnosti strahu in fenotipov okrevanja strahu.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. in LeDoux, JE. Individualne razlike v strahu: razlikovanje fenotipov odzivnosti na strah in ponovne vzpostavitve strahu. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE. Individualne razlike v strahu: izolacija odziva na strah in tabela za obnovo strahu.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. in LeDoux, JE. Individualne razlike v strahu: izolacija odzivov na strah in fenotip okrevanja strahu.J. Trauma.tlak 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Odziv akustičnega preplaha pri podganah napoveduje interindividualne razlike v izumrtju strahu. Russo, AS & Parsons, RG Odziv akustičnega preplaha pri podganah napoveduje interindividualne razlike v izumrtju strahu.Russo, AS in Parsons, RG. Odziv akustičnega preplaha pri podganah napoveduje individualne razlike v izumrtju strahu. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS in Parsons, RG. Odziv akustičnega preplaha pri podganah napoveduje individualne razlike v izumrtju strahu.Nevrobiologija.študija.Spomin.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Individualna variabilnost pri odpoklicu izumrtja strahu je povezana s fosforilacijo mitogen-aktivirane proteinske kinaze v infralimbičnem korteksu. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Individualna variabilnost pri odpoklicu izumrtja strahu je povezana s fosforilacijo mitogen-aktivirane proteinske kinaze v infralimbičnem korteksu.Russo, AS, Lee, J. in Parsons, RG. Individualna variabilnost pri izumrtju priklica strahu je povezana z mitogen-aktivirano fosforilacijo protein kinaze v infralimbičnem korteksu. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Spomin na bledenje strahu je povezan z individualnimi razlikami v periferni fosforifikaciji.Russo, AS, Lee, J. in Parsons, RG. Individualne razlike v izumrtju strahu med priklicem so povezane s fosforilacijo mitogen-aktiviranih proteinskih kinaz v skorji spodnjih okončin.Psihofarmakologija 236 (7), 2039–2048 (2019).